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厭氧培養(yǎng)箱使用方法
更新時(shí)間:2016-12-09   點(diǎn)擊次數(shù):3015次

 厭氧培養(yǎng)箱是一種在無(wú)氧環(huán)境下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及操作的裝置,可培養(yǎng)zui難生長(zhǎng)的厭氧升物,又能避免以往厭氧生物在大氣操作時(shí)接觸氧氣而死亡的危險(xiǎn) 。廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)、微生物、農(nóng)業(yè)科學(xué)、藥物學(xué)的研究和生產(chǎn),已經(jīng)成為上述領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)室常用的儀器。我們?cè)谑褂萌绾握_規(guī)范的操作厭氧培養(yǎng)箱呢,下面就做簡(jiǎn)單介紹。
一、操作形成厭氧環(huán)境

1、調(diào)整混氮?dú)馄?、合氣瓶輸出壓力:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力為0.1Mpa左右。
2、接通電源開(kāi)關(guān),開(kāi)控溫儀,調(diào)節(jié)所需溫度,操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。
3、按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個(gè)無(wú)毒塑料袋。
4、操作室內(nèi)放入經(jīng)過(guò)干燥過(guò)1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入?yún)捬踔甘緞ǚ忾])。
5、 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門(mén),并抽真空校驗(yàn)。
6、操作室內(nèi)*次置換(氮?dú)庵脫Q):
(1)先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,另一頭插入塑料袋。
(2)接通氮?dú)膺M(jìn)氣路,打開(kāi)氮?dú)饪刂崎y,使二只塑料袋充足氮?dú)猓缓笤o袋口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
(4)把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸地放于操作室內(nèi),至全部放出。
7、操作室第二次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一次充氮過(guò)程,并注意隨時(shí)開(kāi)閉排氣閥。

8、操作室第三次置換(混合氣體置換):
(混合氣體配比為:N2 90%;H2 5%;CO2 5%)。
(1)調(diào)換氣路打開(kāi)混合氣道通閥門(mén)進(jìn)氣,充氣時(shí)要隨時(shí)開(kāi)閉排氣閥。
(2)混合氣充滿(mǎn)塑料袋后,關(guān)掉混合氣直通閥(三通閥)。
(3)把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。
(4)通過(guò)三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。
9、操作室內(nèi)打開(kāi)鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時(shí)后打開(kāi)厭氧指示條觀察其變色,變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。
10、開(kāi)紫外線(xiàn)滅菌燈,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理。滅菌時(shí)間自定。

二、菌種的置入和培養(yǎng)

1、檢查取樣室內(nèi)門(mén)并關(guān)緊之。
2、打開(kāi)取樣室外門(mén),將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門(mén)。
3、 取樣室充氮置換三次過(guò)程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打開(kāi)氮?dú)忾y門(mén)進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位后進(jìn)行下次操作。
4、如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
5、取樣室內(nèi)外門(mén)開(kāi)啟,關(guān)緊要抽低真空度100毫米汞柱(13 Kpa)檢驗(yàn)及幫助操作。
6、厭氧培養(yǎng)箱需要長(zhǎng)期連續(xù)使用的條件:
(1)每天在操作室內(nèi)觀察厭氧指示條,正常情況下可繼續(xù)使用。如不正常就必須重新?lián)Q氣。
(2)要長(zhǎng)期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補(bǔ)進(jìn)的氫氣能和微量的氧結(jié)合通過(guò)催化吸收,保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。
(3)連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
7、接種棒滅菌器的應(yīng)用:
(1)隨時(shí)用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進(jìn)行殺菌(接種棒)。
(2)熔蠟處可直接放上,試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。

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